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雙槽二維梯度PCR儀該如何設(shè)置合適的退火溫度?

更新時(shí)間:2021-12-18      點(diǎn)擊次數(shù):2124
  雙槽二維梯度PCR儀就是將多個(gè)的PCR反應(yīng)放在一起做,不用一次一次的作很多次,溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度,或者說(shuō)可以在適合的退火溫度下擴(kuò)增出目的條帶。除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)12個(gè)不同退火溫度的PCR反應(yīng),在梯度模塊上,可實(shí)現(xiàn)對(duì)梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,自由編程12道溫度,梯度實(shí)現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時(shí)進(jìn)行熱循環(huán)。僅一次實(shí)驗(yàn)就能確定特定體系相應(yīng)的退火溫度。從而可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,大大提高PCR 科研效率。
  雙槽二維梯度PCR儀如何設(shè)置合適的退火溫度進(jìn)行摸索。它是以合成引物的退火溫度為參考值,在進(jìn)行同一個(gè)PCR反應(yīng)時(shí),同時(shí)設(shè)置多個(gè)退火溫度進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)。這些退火溫度呈現(xiàn)梯度遞增或遞減,通過(guò)梯度PCR確定適合儀器的退火溫度。
  雖然我們可以通過(guò)梯度PCR摸索出適合儀器的退火溫度,但在實(shí)際應(yīng)用中仍然會(huì)遇到諸多困難。例如我們?cè)谝慌_(tái)PCR儀上摸索出合適的退火溫度,當(dāng)換到另一臺(tái)儀器(同一型號(hào))上進(jìn)行相同PCR實(shí)驗(yàn)時(shí),有時(shí)獲得的結(jié)果會(huì)不理想;在一臺(tái)PCR儀摸索出的退火溫度,換到其它品牌或型號(hào)的PCR儀上時(shí),獲得的結(jié)果也是不理想;使用一種耗材獲得好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,當(dāng)更換其它耗材時(shí),同樣獲得不理想的結(jié)果等。遇到上述狀況時(shí),有時(shí)研究人員往往會(huì)很困惑,這是什么原因造成的?如何解決呢?
  雙槽二維梯度PCR儀可領(lǐng)域于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測(cè)、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Picymerase Chain Reaction , PCR)為特征的、以檢測(cè)DNA/RNA為目的的各種病原體檢測(cè)及基因分析。
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