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非洲豬瘟PCR儀可以對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)

更新時(shí)間:2024-01-02      點(diǎn)擊次數(shù):791
  非洲豬瘟PCR儀是用于進(jìn)行ASFVPCR檢測(cè)的儀器。它通常由PCR反應(yīng)倉、溫控系統(tǒng)、熒光檢測(cè)系統(tǒng)等部分組成,可以對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)。
 
  非洲豬瘟PCR儀的檢測(cè)原理如下:
 
  需要提取樣品中的ASFVDNA。對(duì)于病毒感染的組織樣品,可以通過離心、裂解和蛋白酶處理等步驟來提取病毒DNA。對(duì)于血液樣品,可以通過離心分離白細(xì)胞,并使用DNA提取試劑盒來提取DNA。
 
  然后,將提取到的ASFVDNA添加到含有引物、酶和核苷酸的PCR反應(yīng)體系中。引物的設(shè)計(jì)應(yīng)基于ASFV的特異性序列,以確保只有ASFVDNA能夠被擴(kuò)增。
 
  接下來,PCR反應(yīng)倉中的溫控系統(tǒng)會(huì)依次對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行一系列的溫度變化。首先,將PCR反應(yīng)體系加熱至高溫(通常為95°C),使DNA雙鏈解離成兩條單鏈。然后,將溫度降至適宜的擴(kuò)增溫度(通常為50-60°C),使引物與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)結(jié)合。將溫度升高至延伸溫度(通常為72°C),使DNA聚合酶在引物的引導(dǎo)下合成一個(gè)新的DNA鏈。
 
  在每一輪的PCR循環(huán)中,ASFVDNA的數(shù)量將以指數(shù)形式增加。通常,PCR反應(yīng)會(huì)進(jìn)行25-35個(gè)循環(huán),以保證ASFVDNA的充分?jǐn)U增。
 
  PCR反應(yīng)結(jié)束后,可以使用熒光檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)PCR產(chǎn)物。在PCR過程中,將一種與PCR產(chǎn)物特異性結(jié)合的熒光探針添加到反應(yīng)體系中。在熒光檢測(cè)系統(tǒng)的作用下,可以通過熒光信號(hào)的變化來判斷PCR產(chǎn)物的存在與否。一般來說,如果PCR得到了明確的陽性結(jié)果,熒光信號(hào)將增加。
 
  非洲豬瘟PCR儀的使用方法:
 
  1.從豬病毒感染的組織或血液中提取病毒RNA或DNA。
 
  2.根據(jù)試劑盒說明書,將所需的試劑和樣品添加到PCR反應(yīng)管中。試劑盒通常包括PCR引物、酶、緩沖液等。
 
  3.根據(jù)試劑盒說明書,調(diào)整PCR儀的參數(shù),包括溫度、時(shí)間和循環(huán)數(shù)。
 
  4.將PCR反應(yīng)管放入PCR儀,并啟動(dòng)程序。
 
  5將按照設(shè)定的程序進(jìn)行溫度循環(huán),使DNA逐漸擴(kuò)增。一般情況下,PCR反應(yīng)需要1-2小時(shí)完成。
 
  6.將PCR反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析,以確定是否存在ASF病毒DNA。
非洲豬瘟PCR儀
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